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            ELISA檢測試劑盒顯色淡，靈敏度偏低是什么原因

            更新時間：2021-07-28      瀏覽次數：2177


            仁捷生物ELISA檢測試劑盒顯色淡，靈敏度偏低是什么原因，小編幫您找一下原因：
            以下幾點，請注意看哦

            問題

            序號

            可能原因

            解決方法

            顯色淡，靈敏度偏低

            1

             試劑盒未充分平衡

            試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）

            2

             樣品不適合做ELISA檢測

            樣品一般選擇培養上清、血清、血漿。其他樣品形式可能不適合做ELISA檢測或者需要優化檢測的條件（例如稀釋液的成分）

            3

             酶標板在貯存或洗后拍干時過分干燥

            防止板過于干燥

            4

             包被抗體遭到破壞

            操作溫和，移液槍不能碰到孔底

            5

             樣本和抗體孵育條件不合適

            按照說明書條件，建議孵育過程中全程振蕩孵育。

            6

             洗滌浸泡時間過長

            按照說明書操作。勿人為增加浸泡時間；

            7

             偶聯HRP試劑污染

            棄去試劑，重新配置

            8

             錯誤的稀釋偶聯HRP試劑

            棄去試劑，重新配置

            9

             TMB底物孵育時間過短，因非人為因素影響，需要優化孵育時間

            確定合適的孵育時間：人為判定-最高濃度的標準品出現深藍色；S4-5有淡藍色；機器判定620 nm波長下測定OD值達到0.6-0.65

            10

             樣本濃度過高或存在基質效應

            建議做不同稀釋倍數，確認樣本最佳稀釋倍數。

            11

             酶標儀濾光片設置有問題或者波長選擇不對

            確認儀器設置及選擇正確的波長檢測。

            12

             酶標板不適合做ELISA

            不能使用細胞培養板，建議使用ELISA專用高吸附力板子。


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