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            人生長分化因子15(GDF15)ELISA試劑盒技術解析與應用指南

            更新時間:2025-04-02      瀏覽次數:469

            人生長分化因子15(GDF15)ELISA試劑盒技術解析與應用指南

            上海仁捷生物科技有限公司

            摘要

            人生長分化因子15(Growth Differentiation Factor 15,GDF15)是一種重要的細胞應激反應蛋白,在多種病理生理過程中發揮關鍵作用。本文詳細介紹了上海仁捷生物科技有限公司自主研發的GDF15 ELISA試劑盒的技術原理、性能參數、操作流程及典型應用案例,為研究人員提供全面的技術參考。

            1. 產品概述

            1.1 GDF15生物學意義

            GDF15屬于TGF-β超家族成員,又稱MIC-1(macrophage inhibitory cytokine-1),具有以下重要功能:

            • 調控能量代謝平衡

            • 參與炎癥反應

            • 影響腫瘤發生發展

            • 與心血管疾病密切相關

            1.2 上海仁捷GDF15 ELISA試劑盒特點

            • 高靈敏度:檢測下限達10 pg/mL

            • 寬檢測范圍:50-1600 pg/mL

            • 優異特異性:不與TGF-β家族其他成員交叉反應

            • 穩定可靠:批內變異系數<8%,批間變異系數<10%

            • 多種樣本適用:血清、血漿、細胞培養上清等

            2. 技術原理

            2.1 雙抗體夾心ELISA原理

            本試劑盒采用經典雙抗體夾心法:

            1. 包被:高親和力抗GDF15單抗預包被于微孔板

            2. 結合:樣本中GDF15與包被抗體特異性結合

            3. 檢測:加入生物素標記的二抗

            4. 信號放大:鏈霉親和素-HRP復合物結合

            5. 顯色:TMB底物顯色反應

            2.2 檢測系統優化

            • 抗體配對:經過嚴格篩選的高效抗體對

            • 信號放大:生物素-親和素放大系統

            • 干擾控制:特殊緩沖體系降低基質效應

            3. 實驗操作指南

            3.1 樣本處理建議

            樣本類型處理方法注意事項
            血清室溫凝固30min后,2000×g離心15min避免溶血
            血漿EDTA抗凝,離心去除血小板及時分離
            細胞上清0.22μm濾膜過濾避免反復凍融

            3.2 標準操作流程

            1. 試劑準備(室溫平衡30min)

            2. 加樣(標準品/樣本各100μL)

            3. 37℃孵育90min

            4. 洗板(自動洗板機推薦)

            5. 加檢測抗體(100μL/孔)

            6. 37℃孵育60min

            7. 洗板

            8. 加酶結合物(100μL/孔)

            9. 37℃孵育30min

            10. 洗板

            11. 顯色(TMB,15min)

            12. 終止反應

            13. 450nm讀數

            3.3 數據分析

            • 四參數擬合標準曲線

            • 質控要求:R2≥0.99

            • 推薦使用專業ELISA分析軟件

            4. 典型應用案例

            4.1 心血管疾病研究

            案例:急性心肌梗死患者血清GDF15動態監測
            方法:收集50例AMI患者發病后0、6、12、24、48h血清樣本
            結果:GDF15水平在發病6h顯著升高,與心肌損傷程度正相關(r=0.72)

            4.2 腫瘤研究

            案例:結直腸癌患者預后評估
            方法:檢測120例患者術前血清GDF15水平
            結果:高GDF15組(>200pg/mL)5年生存率顯著低于低水平組(38% vs 72%)

            4.3 代謝性疾病研究

            案例:2型糖尿病肥胖患者干預研究
            方法:檢測生活方式干預前后GDF15變化
            結果:有效減重組GDF15下降幅度顯著(P<0.01)

            5. 常見問題解決方案

            5.1 技術問題排查

            問題現象可能原因解決方案
            標準曲線不佳標準品溶解不充分充分震蕩混勻
            背景值高洗板不充分增加洗滌次數
            重復性差操作不一致統一操作手法

            5.2 結果解讀要點

            • 注意樣本采集時間(晝夜節律影響)

            • 考慮藥物干擾(如二甲雙胍可升高GDF15)

            • 結合臨床其他指標綜合分析

            6. 產品服務支持

            6.1 上海仁捷特色服務

            • 免費技術咨詢:專業團隊提供實驗設計指導

            • 方法學驗證服務:協助完成方法學比對

            • 定制化服務:可根據需求調整檢測范圍

            關鍵詞:GDF15、ELISA試劑盒、上海仁捷生物、心血管標志物、腫瘤標志物、代謝調控


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